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淺談內毒素對細胞培養的影響

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內毒素對細胞培養的影響

在細胞培養的精密世界中，一個微小的污染都可能dian覆整個實驗的進程。今天，我們要聚焦的正是這個不容忽視的隱形威脅——內毒素。

BioProE是我公司自產的DPBS，低內毒素，對細胞的傷害降到zui低！

內毒素：細胞培養的“隱形刺客"

內毒素，這個聽起來有些陌生的名詞，實際上在細胞培養中扮演著不容忽視的角色。它是革蘭氏陰性菌細胞壁的一種成分，當細菌死亡或細胞壁破裂后，內毒素就會被釋放出來。這些微小的分子，雖然肉眼不可見，但卻能對細胞產生巨大的影響。

在細胞培養過程中，內毒素的污染可能導致細胞生長緩慢、細胞毒性增加，甚至影響瞬時轉染的效率。想象一下，您精心設計的實驗，因為內毒素的污染而功虧一簣，是不是非常令人沮喪？對于追求精準與高效的現代生物研究而言，內毒素控制成為了不可回避的挑戰。

圖1 內毒素分子結構

內毒素對細胞培養的影響

1. 免疫和炎癥反應： 內毒素可以激活細胞的免疫反應，導致炎癥因子的釋放，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）等。這些炎癥因子可以影響細胞的生理功能，導致細胞內信號通路的紊亂，甚至可能引發細胞凋亡。

2. 細胞生長和代謝的影響： 高水平的內毒素暴露可能影響細胞的生長和代謝。細胞在免疫激活狀態下可能會減緩生長，因為它們需要將資源用于炎癥反應。此外，內毒素可能干擾細胞的代謝途徑，影響蛋白質合成、DNA合成等。

3. 實驗結果的“ding時zhadan"：內毒素的存在使實驗結果變得不穩定，可靠性大打折扣。

4. 影響細胞因子和蛋白質的表達：內毒素的存在可能導致細胞產生炎癥相關的細胞因子和蛋白質的表達增加。這可能對特定的研究課題產生影響，如細胞信號通路、蛋白質相互作用等的研究。

內毒素對瞬時轉染的影響

內毒素的存在會極大程度地影響轉染效率。由于內毒素的兩親性和負電荷性，性質類似于DNA，因此在質粒純化中會伴隨質粒一同被純化出來。這些內毒素在轉染過程中可能與轉染試劑和質粒形成不穩定的復合物，從而降低質粒與細胞的結合效率和轉染效率。

具體來說，高純度的質粒、低類毒素細胞生長環境是獲得高轉染效率的必要條件，內毒素含量越低，轉染效率也相應提高。特別是在使用陽離子聚合物轉染試劑時，內毒素的影響更為顯著，所以確保細胞培養液中低類毒素含量是非常重要的。

1. 轉染效率降低：干擾轉染復合物進入細胞或影響其在細胞內的作用，導致成功轉染的細胞比例下降。

2. 基因表達異常：使轉入基因的表達水平不穩定或降低，影響實驗結果的準確性和可重復性。 
3. 細胞應激反應：引發細胞一系列應激相關的信號通路變化，進而間接影響轉染過程和后續的基因表達。

如何降低細胞培養中的內毒素含量？

1.所有實驗室器皿、培養基原料、以及適當的實驗室技術的che底清潔，對于大幅降低細胞培養實驗室中的內毒素水平至關重要。

2.使用來自可靠試劑供應商提供的經內毒素測試的試劑、補劑和培養基

總之，內毒素對細胞培養有負面影響，需要合理選擇試劑，并嚴格控制培養條件，以降低內毒素對細胞的不良影響。選擇合適的產品，可以讓你的細胞培養實驗更省心，尤其是難養的免疫細胞，干細胞等，更需要使用超低內毒素PBS、RPMI1640、DMEM、DMEM/F12等進行培養。